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結構解析

一、結構解析簡介:從天然物質(zhì)中分離得到的多糖、蛋白質(zhì),或者自己合成的有機化合物與聚合物等物質(zhì),即使具有很強的活性和較大的安全性,如果結構不清楚,則無法進一步開展藥理學、毒理學、材料性質(zhì)的研究,也就不可能進行人工合成或結構修飾改造工作,更談不上高質(zhì)量的新藥、材料、工藝品的開發(fā)研究,其學術和實際應用價值

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結構解析

一、結構解析簡介:

從天然物質(zhì)中分離得到的多糖、蛋白質(zhì),或者自己合成的有機化合物與聚合物等物質(zhì),即使具有很強的活性和較大的安全性,如果結構不清楚,則無法進一步開展藥理學、毒理學、材料性質(zhì)的研究,也就不可能進行人工合成或結構修飾改造工作,更談不上高質(zhì)量的新藥、材料、工藝品的開發(fā)研究,其學術和實際應用價值就會大大降低。結構解析方法主要對未知物成分的組成、分子結構進行深入剖析和確證,分析結果可以判斷該物質(zhì)的結構并輔助判斷未知物產(chǎn)生的根源。

 

二、結構解析的方法:

不同樣品有不同解析方法,主要針對多糖、小分子有機化合物、高分子聚合物以及蛋白質(zhì)多肽樣品。

結構解析的一般程序

 

1、確定樣品是否為純凈物

 

2、結構解析技術路線

 

3、幾種常規(guī)解析分類

3.1、小分子有機化合物的結構解析:

單一組分化合物通常是有機合成、天然產(chǎn)物提取、發(fā)酵提取或半制備等方式得到,通過液相或氣相等檢測手段評估純度(原料藥純度通?!?9.0%;雜質(zhì)純度通?!?0.0%)后,主要通過核磁共振譜(1H-NMR)、光譜及常規(guī)質(zhì)譜(MS)等方法,基于合成機理推斷平面結構;核磁共振、質(zhì)譜和紅外是結構解析中最重要的三件寶物,核磁共振譜圖是推導未知物結構或者確認結構的主要方法,因為它們的結構信息量最豐富、譜圖的可解析性最高。第二種技術是質(zhì)譜,無論進行何種結構解析,它都有非常重要的價值,基于離子和碎片離子的分析,研究者們能完美地確定一種有機分子的一級結構。第三種技術是紅外光譜,它和另外另種技術是互補的,紅外光譜的主要特征是以捷徑直接鑒定官能團。核磁共振聚焦于單個的原子和核,紅外光譜提供整個官能團的信息。

主要方法有傅里葉變換紅外光譜儀、高分辨質(zhì)譜、X射線熒光光譜分析儀、核磁一維(氫譜,碳譜,DEPT135)、核磁二維(HMBC,HSQC, HHCOSY,NOESY)以及數(shù)據(jù)解析;

 

 

3.2、多糖的結構解析:

多糖(polysaccharide)是由糖苷鍵結合的糖鏈,至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物,可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的單糖組成的多糖稱為同多糖,如淀粉、纖維素和糖原;以不同的單糖組成的多糖稱為雜多糖,如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖等組成。多糖不是一種純粹的化學物質(zhì),而是聚合程度不同的物質(zhì)的混合物。多糖類一般不溶于水,無甜味,不能形成結晶,無還原性和變旋現(xiàn)象。多糖也是糖苷,所以可以水解,在水解過程中,往往產(chǎn)生一系列的中間產(chǎn)物,最終完全水解得到單糖。多糖檢測平臺建立的包括單糖組成解析、多糖紅外鑒定分析、多糖甲基化、一維核磁(氫譜、碳譜、DEPT135)、二維核磁(HMBC、 HSQC、HHCOSY、NOESY)以及數(shù)據(jù)解析等一系列的多糖分析檢測技術,為多糖產(chǎn)品研究、研發(fā)提供專業(yè)技術服務及支撐。

酸性糖甲基化

靈芝多糖結構

 

3.3、 蛋白質(zhì)/多肽的結構解析:

蛋白質(zhì)和多肽是由20種氨基酸按照一定的順序通過肽鍵連接成長鏈,然后通過鏈內(nèi)、鏈間的離子鍵、疏水作用等多種作用力進行折疊卷曲形成一定的構象并發(fā)揮其獨特作用。氨基酸的排列順序即蛋白質(zhì)的一級結構,這決定了蛋白質(zhì)的高級結構及功能。基于LCMS/MS平臺,可以很好的解析蛋白質(zhì)一級結構。蛋白質(zhì)通過胰蛋白酶等多種酶切后,裂解成多種小分子多肽片段。本公司使用NanoLC-Obitrap 質(zhì)譜儀對多肽片段進行解析,樣品被離子化后進入質(zhì)譜儀,得到一級質(zhì)譜圖后,篩選母離子進行二級質(zhì)譜圖解析肽段序列。最后綜合分析比對得出蛋白質(zhì)的一級氨基酸序列。對于蛋白質(zhì)的高級結構,圓二色譜可以解析a螺旋,b折疊等蛋白組二級結構。而蛋白質(zhì)三級及更高的空間結構,則可以用晶體法、核磁共振波譜以及冷凍電鏡來解析,從而揭示蛋白質(zhì)的活性機理。

蛋白質(zhì)的一級結構可以用氨基酸測序;蛋白質(zhì)二級、三級結構可以用核磁一維(氫譜,碳譜,DEPT135)、核磁二維(HMBC、 HSQC、HHCOSY、NOESY 、NOE)、圓二色譜、LCMS/MS平臺、飛行時間質(zhì)譜質(zhì)譜、數(shù)據(jù)解析。

多肽結構解析

 

四、服務范圍:

  • 小分子有機物結構分析

  • 化學成分結構分析

  • 未知物結構分析

  • 天然產(chǎn)物結構分析

  • 藥物雜質(zhì)結構分析

  • 高分子聚合物結構分析

  • 蛋白質(zhì)、多肽結構分析


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結構解析

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